氯磷酸二鈉脂質(zhì)體在巨噬細胞中溶酶體磷脂酶影響下脂質(zhì)體的雙層結(jié)構(gòu)破壞,溶解在脂質(zhì)體雙層之間的水性區(qū)室中的藥物被釋放到細胞中,氯膦酸鹽在細胞內(nèi)積累,并且在超過閾值濃度后,細胞被不可逆地損傷并通過細胞凋亡而死亡。
氯磷酸二鈉脂質(zhì)體使用方法:
1.將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi),從孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈,2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈;隔日尾靜脈注射200μl產(chǎn)品。
2.行尾部靜脈注射時,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出約2cm一段,使皮膚緊張,靜脈更為充盈,右手持1ml針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進針,開始注入藥物時應(yīng)緩慢,仔細觀察,如果無阻力,無白色皮丘出現(xiàn),說明已刺入血管,可正式注入藥物。
3.有的實驗需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始,按次序向尾根部移動,更換血管位置注射給藥。根據(jù)實驗要求制定注射日程,通過免疫組化或流式檢測巨噬細胞去除效率。
兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,磷脂雙分子層中間通過水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質(zhì)體的過程中被包裹進磷脂雙分子層之間的水相中,游離的氯磷酸鹽不能自由的通過脂質(zhì)體的磷脂雙分子層。隨著氯磷酸二鈉脂質(zhì)體被巨噬細胞吞噬,在巨噬細胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來,并累積在細胞內(nèi),當(dāng)其達到一定濃度時,巨噬細胞將會受到不可逆轉(zhuǎn)的損傷,從而進入凋亡過程。